Imortalização de células-tronco mesenquimais derivadas de medula óssea de ratos (2021)
- Authors:
- USP affiliated author: KADOOKA, MARCELLA YUMI - FORP
- School: FORP
- Subjects: CÉLULAS-TRONCO; REGENERAÇÃO ÓSSEA; MEDULA ÓSSEA
- Keywords: Células-tronco mesenquimais; Imortalização celular; Terapia celular; Mesenchymal stem cells; Cell immortalization, cell therapy, bone marrow; Cell therapy; Bone marrow
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: O tecido ósseo apresenta alto potencial regenerativo após injúrias. Entretanto, é bastante comum que o dano exceda a capacidade regenerativa do tecido, o que demanda tratamentos adicionais. Nesse cenário, a terapia celular tem sido objeto de investigação pelo nosso grupo de pesquisa, que tem advogado o uso de célulastronco mesenquimais derivadas de medula óssea (BM-MSCs) geneticamente editadas para sobre-expressar fatores de crescimento relacionados a osteogênese e angiogênese. No entanto, após um determinado número de divisões celulares, as BMMSCs entram em senescência e para evitar isso, o presente projeto teve como objetivo a produção de linhagens de BM-MSCs imortalizadas (iBM-MSCs). As BMMSCs foram obtidas da medula óssea de ratos da linhagem Sprague-Dawley e imortalizadas pela sobre-expressão da proteína da transcriptase reversa da telomerase humana (hTERT). As iBM-MSCs foram caracterizadas pela expressão gênica de hTERT por PCR em tempo real e expressão proteica de TERT por imunofluorescência, proliferação celular, expressão de marcadores de superfície por citometria de fluxo e pela diferenciação osteoblástica, através da atividade de fosfatase alcalina e formação de matriz mineralizada. Os dados numéricos foram comparados por ANOVA e o nível de significância foi de 5%. O ensaio de PCR em tempo real evidenciou maior expressão gênica de hTERT em iBM-MSCs quando comparadas com as BM-MSCs, assim como o ensaio de imunofluorescência que evidenciou a expressão proteica de TERT em iBM-MSCs que não foi detectada em BM-MSCs. Os marcadores de superfície CD29 e CD90 foram detectados em alta porcentagem de BM-MSCs e iBM-MSCs. As iBM-MSCs apresentaram atividade proliferativa, atividade de fosfatase alcalina e mineralização da matriz extracelular nas passagens celulares 10, 20 e 30. Os resultados permitem concluir que a expressão de hTERT é um método eficaz para alcançar o processo deimortalização celular, podendo essas células serem expandidas, mantendo características de MSCs e potencial de diferenciação osteogênica até a passagem 30. Futuramente, essas células poderão ser geneticamente editadas e utilizadas para tratamento de defeitos ósseos
- Imprenta:
- Place of publication: Ribeirão Preto
- Date published: 2021
-
ABNT
KADOOKA, Marcella Yumi. Imortalização de células-tronco mesenquimais derivadas de medula óssea de ratos. 2021. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação) – Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2021. Disponível em: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/ac6b25d4-eae0-4dfa-8f79-1a867924fe4e/Marcella_Yumi_Kadooka.pdf. Acesso em: 08 maio 2024. -
APA
Kadooka, M. Y. (2021). Imortalização de células-tronco mesenquimais derivadas de medula óssea de ratos (Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação). Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/ac6b25d4-eae0-4dfa-8f79-1a867924fe4e/Marcella_Yumi_Kadooka.pdf -
NLM
Kadooka MY. Imortalização de células-tronco mesenquimais derivadas de medula óssea de ratos [Internet]. 2021 ;[citado 2024 maio 08 ] Available from: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/ac6b25d4-eae0-4dfa-8f79-1a867924fe4e/Marcella_Yumi_Kadooka.pdf -
Vancouver
Kadooka MY. Imortalização de células-tronco mesenquimais derivadas de medula óssea de ratos [Internet]. 2021 ;[citado 2024 maio 08 ] Available from: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/ac6b25d4-eae0-4dfa-8f79-1a867924fe4e/Marcella_Yumi_Kadooka.pdf
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